人Bcl2關聯(lián)死亡啟動子elisa試劑盒是用于定量檢測人體內BAD蛋白水平的實驗室診斷工具。BAD是一種重要的細胞凋亡調節(jié)蛋白,與Bcl-2家族的其他成員相互作用,參與調控細胞生存和死亡的信號通路。在多種疾病狀態(tài)下,包括癌癥、神經(jīng)退行性疾病等,BAD蛋白的水平及活性會發(fā)生顯著變化。因此,監(jiān)測BAD的表達對于疾病的診斷、預后評估以及治療效果的判斷具有重要價值。
1.特異性抗體:針對人BAD的捕獲抗體和檢測抗體。
2.標準品:一系列已知濃度的人BAD蛋白,用于構建標準曲線。
3.底物:用于顯色反應的物質,如TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)。
4.終止液:停止顯色反應的強酸溶液。
5.洗滌液:清洗微孔板中未結合物質的緩沖溶液。
6.稀釋液:用于稀釋樣品和標準品的溶液。
7.封板膜:防止液體蒸發(fā)和外部污染的粘性膜片。
8.說明書:詳細描述實驗操作步驟和注意事項的文檔。
使用人Bcl2關聯(lián)死亡啟動子elisa試劑盒進行檢測的基本步驟如下:
1.樣本準備:采集血液或組織樣本,并根據(jù)說明進行適當處理以獲得血清或血漿。
2.標準品制備:按照說明稀釋標準品至不同濃度,用于制作標準曲線。
3.加樣:將標準品和待測樣品加入預涂有抗人BAD抗體的微孔板中。
4.溫育:在特定溫度下孵育一定時間,使得樣品中的BAD與捕獲抗體充分結合。
5.洗滌:去除未結合的物質,確保檢測結果的準確性。
6.加入檢測抗體:加入對BAD的另一個表位具有特異性的檢測抗體。
7.再次溫育和洗滌:同上,確保有效結合。
8.加入底物:加入底物啟動顯色反應,一般需要避光并在恒溫條件下進行。
9.加入終止液:在適當?shù)臅r間點加入終止液,停止顯色反應。
10.讀數(shù)分析:立即在酶標儀上讀取各孔的吸光度值,并結合標準曲線計算樣品中BAD的濃度。